TEST NA HCV u jednom koraku (puna krv/serum/plazma)
TEST NA HCV u jednom koraku (puna krv/serum/plazma)
SAŽETAK
Opća metoda otkrivanja infekcije HCV-om je promatranje prisutnosti antitijela na virus EIA metodom nakon čega slijedi potvrda Western Blotom. One Step HCV test je jednostavan, vizualni kvalitativni test koji otkriva antitijela u ljudskoj punoj krvi/serumu/plazmi. Test se temelji na imunokromatografiji i može dati rezultat unutar 15 minuta.
NAMJENA
Jednostepeni HCV test je brzi imunokromatorski test poboljšan koloidnim zlatom za kvalitativno otkrivanje antitijela na virus hepatitisa C (HCV) u ljudskoj punoj krvi/serumu/plazmi. Ovaj test je test probira i svi pozitivni rezultati moraju se potvrditi alternativnim testom kao što je Western Blot. Test je namijenjen isključivo zdravstvenim djelatnicima. I testiranje i rezultati testiranja namijenjeni su samo medicinskim i pravnim stručnjacima, osim ako nije drugačije dopušteno propisima u zemlji upotrebe. Test se ne smije koristiti bez odgovarajućeg nadzora.
NAČELO POSTUPKA
Test počinje s nanošenjem uzorka na jažicu uzorka i dodatkom priloženog razrjeđivača uzorka odmah. Konjugat HCV antigen-koloidno zlato ugrađen u jastučić za uzorak reagira s HCV antitijelom prisutnim u serumu ili plazmi, tvoreći kompleks konjugat/HCV protutijelo. Kako se smjesa pusti da migrira duž test trake, kompleks konjugat/HCV protutijelo je zarobljen proteinom A koji veže protutijelo imobiliziran na membrani tvoreći obojenu traku u testnoj regiji. Negativan uzorak ne daje testnu liniju zbog odsutnosti konjugata koloidnog zlata/kompleksa protutijela protiv HCV. Antigeni korišteni u testu su rekombinantni proteini koji odgovaraju visoko imunoreaktivnim regijama HCV-a. Obojena kontrolna traka u kontrolnoj regiji pojavljuje se na kraju postupka ispitivanja bez obzira na rezultat testa. Ova kontrolna traka rezultat je vezanja konjugata koloidnog zlata na anti-HCV protutijelo imobilizirano na membrani. Kontrolna linija pokazuje da je konjugat koloidnog zlata funkcionalan. Odsutnost kontrolne trake ukazuje da je test nevažeći.
ISPORUČENI REAGENSI I MATERIJALI
Ispitni uređaj pojedinačno folijom u vrećici sa sredstvom za sušenje
• Plastična kapaljka.
• Razrjeđivač uzorka
• umetak paketa
POTREBNI MATERIJALI ALI NIJE DOBIJENI
Pozitivne i negativne kontrole (dostupne kao zasebna stavka)
SKLADIŠTENJE I STABILNOST
Kompleti za testiranje moraju se čuvati na temperaturi od 2-30 ℃ u zapečaćenoj vrećici iu suhim uvjetima.
UPOZORENJA I MJERE OPREZA
1) Svi pozitivni rezultati moraju biti potvrđeni alternativnom metodom.
2) Tretirajte sve uzorke kao potencijalno zarazne. Nosite rukavice i zaštitnu odjeću pri rukovanju uzorcima.
3) Uređaje koji se koriste za ispitivanje potrebno je autoklavirati prije odlaganja.
4) Nemojte koristiti materijale kompleta nakon isteka roka trajanja.
5) Nemojte izmjenjivati reagense iz različitih serija.
PRIKUPLJANJE I ČUVANJE UZORAKA
1) Uzmite uzorke pune krvi/seruma/plazme slijedeći redovite kliničke laboratorijske postupke.
2) Čuvanje: puna krv se ne može zamrznuti. Uzorak treba čuvati u hladnjaku ako se ne koristi isti dan uzimanja. Uzorke je potrebno zamrznuti ako se ne koriste u roku od 3 dana od prikupljanja. Izbjegavajte zamrzavanje i odmrzavanje uzoraka više od 2-3 puta prije upotrebe. 0,1% natrijevog azida može se dodati uzorku kao konzervans bez utjecaja na rezultate testa.
POSTUPAK ANALIZE
1) Koristeći priloženu plastičnu kapaljku za uzorak, unesite 1 kap (10 μl) pune krvi/seruma/plazme u kružnu jažicu za uzorke na kartici za ispitivanje
2) Dodajte 2 kapi razrjeđivača uzorka u jažicu za uzorak, odmah nakon dodavanja uzorka, iz bočice s razrjeđivačem na vrhu kapaljke (ili sav sadržaj iz jedne ampule za ispitivanje).
3) Interpretirajte rezultate testa na 15 minuta.
Bilješke:
1) Primjena dovoljne količine razrjeđivača uzorka ključna je za valjan rezultat ispitivanja. Ako se migracija (kvašenje membrane) ne primijeti u ispitnom prozoru nakon jedne minute, dodajte još jednu kap razrjeđivača u jažicu za uzorak.
2) Pozitivni rezultati bi se mogli pojaviti već nakon jedne minute za uzorak s visokim razinama HCV antitijela.
3) Nemojte tumačiti rezultate nakon 20 minuta
ČITANJE REZULTATA TESTA
1) Pozitivan: Na membrani se pojavljuju i ljubičastocrvena ispitna traka i ljubičastocrvena kontrolna traka. Što je niža koncentracija antitijela, slabija je testna traka.
2) Negativan: Na membrani se pojavljuje samo ljubičasta crvena kontrolna traka. Odsutnost testne trake ukazuje na negativan rezultat.
3) Nevažeći rezultat: U kontrolnom području uvijek bi trebala postojati ljubičasta crvena kontrolna traka, bez obzira na rezultat testa. Ako se kontrolna traka ne vidi, test se smatra nevažećim. Ponovite test pomoću novog uređaja za ispitivanje.
Napomena: Normalno je imati malo posvijetljeni kontrolni pojas s vrlo jakim pozitivnim uzorcima, sve dok je jasno vidljiv.
OGRANIČENJE
1) U ovom se testu može koristiti samo bistra, svježa, slobodno protočna puna krv/serum/plazma.
2) Najbolji su svježi uzorci, ali se mogu koristiti smrznuti uzorci. Ako je uzorak zamrznut, treba ga ostaviti da se odmrzne u okomitom položaju i provjeriti fluidnost. Puna krv se ne može zamrznuti.
3) Nemojte miješati uzorak. Umetnite pipetu neposredno ispod površine uzorka kako biste sakupili uzorak.
